RNAKit RNA totale semplice

Per l'estrazione dell'RNA totale ad alta efficienza utilizzando la colonna centrifuga ampiamente utilizzata.

Il kit RNAsimple Total RNA adotta un nuovo metodo di estrazione dell'RNA basato sul metodo guanidinio isotiocianato/fenolo. Il Buffer RZ appositamente progettato da TIANGEN è in grado di rimuovere il DNA genomico e le proteine ​​dalle cellule in modo rapido ed efficiente, rendendo l'RNA ottenuto altamente puro e stabile.
Questo kit viene utilizzato per separare l'RNA totale dal sangue, dalle cellule animali, dai tessuti e dai tessuti vegetali. Ogni colonna spin può processare 50-100 mg di tessuto o 5×106cellule alla volta e possono elaborare un gran numero di campioni diversi contemporaneamente. La reazione può essere completata in meno di un'ora e l'RNA totale estratto ha una resa più elevata, una migliore purezza, senza contaminazione da DNA e proteine ​​e può essere utilizzato in vari esperimenti a valle.

Gatto. No Dimensione dell'imballaggio
4992858 50 preparazioni

Dettagli del prodotto

Flusso di lavoro

Esempio sperimentale

FAQ

Tag dei prodotti

Caratteristiche

■ L'RNA ad alta purezza pronto per l'uso è adatto per applicazioni a valle sensibili.
■ Ampie applicazioni: l'RNA purificato può essere applicato a vari campioni sperimentali.
■ L'esperimento può essere completato in 1 ora con semplici operazioni.

Applicazioni

■ RT-PCR
■ Macchia del nord, Macchia del punto.
■ PCR in tempo reale
■ Screening PolyA, traduzione in vitro, analisi della protezione RNasi, clonazione molecolare.

Tutti i prodotti possono essere personalizzati per ODM/OEM. Per dettagli,fare clic su Servizio personalizzato (ODM/OEM)


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    Workflow

    Experimental Example Materiale: 20 mg di tessuto di milza di ratto
    Metodo: l'RNA totale del tessuto di milza di ratto è stato isolato utilizzando il kit RNAsimple Total RNA.
    Risultati: vedere l'immagine dell'elettroforesi su gel di agarosio sopra. Sono stati caricati 2-4 µl di 100 µl di eluati per corsia. L'elettroforesi è stata condotta a 6 V/cm per 30 min su agarosio all'1%.
    D: Blocco della colonna

    A-1 Lisi cellulare o omogeneizzazione non sufficiente

    ---- Ridurre l'utilizzo del campione, aumentare la quantità di tampone di lisi, aumentare l'omogeneizzazione e il tempo di lisi.

    A-2 La quantità di campione è troppo grande

    ---- Ridurre la quantità di campione utilizzato o aumentare la quantità di tampone di lisi.

    D: Bassa resa di RNA

    A-1 Lisi o omogeneizzazione cellulare insufficiente

    ---- Ridurre l'utilizzo del campione, aumentare la quantità di tampone di lisi, aumentare l'omogeneizzazione e il tempo di lisi.

    A-2 La quantità di campione è troppo grande

    ----Si prega di fare riferimento alla capacità di elaborazione massima.

    L'RNA A-3 non viene eluito completamente dalla colonna

    ---- Dopo aver aggiunto acqua RNasi-Free, lasciarla agire per alcuni minuti prima di centrifugare.

    A-4 Etanolo nell'eluente

    ---- Dopo il risciacquo, centrifugare nuovamente e rimuovere il più possibile il tampone di lavaggio.

    A-5 Il terreno di coltura cellulare non è stato completamente rimosso

    ---- Quando si raccolgono le cellule, assicurarsi di rimuovere il più possibile il terreno di coltura.

    A-6 Le cellule immagazzinate in RNAstore non sono efficacemente centrifugate

    ----La densità di RNAstore è maggiore del mezzo di coltura cellulare medio; quindi la forza centrifuga dovrebbe essere aumentata. Si consiglia di centrifugare a 3000x g.

    A-7 Basso contenuto di RNA e abbondanza nel campione

    ---- Utilizzare un campione positivo per determinare se la bassa resa è causata dal campione.

    D: degradazione dell'RNA

    A-1 Il materiale non è fresco

    ---- I tessuti freschi devono essere conservati immediatamente in azoto liquido o messi immediatamente nel reagente RNAstore per garantire l'effetto di estrazione.

    A-2 La quantità di campione è troppo grande

    ---- Ridurre la quantità di campione.

    Contaminazione da A-3 RNasin

    ----Sebbene il tampone fornito nel kit non contenga RNasi, è facile contaminare l'RNasi durante il processo di estrazione e deve essere maneggiato con cura.

    A-4 Inquinamento da elettroforesi

    ---- Sostituire il tampone per elettroforesi e assicurarsi che i materiali di consumo e il tampone di caricamento siano privi di contaminazione da RNasi.

    A-5 Troppo carico per l'elettroforesi

    ---- Ridurre la quantità di caricamento del campione, il caricamento di ciascun pozzetto non deve superare i 2 μg.

    D: Contaminazione del DNA

    A-1 La quantità di campione è troppo grande

    ---- Ridurre la quantità di campione.

    A-2 Alcuni campioni hanno un alto contenuto di DNA e possono essere trattati con DNasi.

    ----Eseguire un trattamento con DNasi privo di RNasi sulla soluzione di RNA ottenuta e l'RNA può essere utilizzato direttamente per esperimenti successivi dopo il trattamento o può essere ulteriormente purificato con kit di purificazione dell'RNA.

    D: Come rimuovere RNase dai materiali di consumo sperimentali e dalla vetreria?

    Per vetreria, cottura a 150°C per 4 h. Per i contenitori di plastica, immersi in 0,5 M NaOH per 10 min, quindi risciacquati accuratamente con acqua priva di RNasi e quindi sterilizzati per rimuovere completamente l'RNasi. I reagenti o le soluzioni utilizzati nell'esperimento, in particolare l'acqua, devono essere privi di RNasi. Utilizzare acqua priva di RNasi per tutte le preparazioni dei reagenti (aggiungere acqua a una bottiglia di vetro pulita, aggiungere DEPC a una concentrazione finale dello 0,1% (V/V), agitare durante la notte e autoclavare).

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