Kit di tessuti puri RNAprep

Per la purificazione fino a 100 μg di RNA totale da tessuti animali.

Il kit RNAprep Pure Tissue fornisce un metodo veloce, semplice ed economico per la purificazione dell'RNA totale da tessuti animali utilizzando un'efficace colonna spin e un sistema tampone unico. Il kit include colonne spin CR3 prive di RNasi per la purificazione di RNA di alta qualità utilizzando la tecnologia a membrana di silice. L'RNA totale di alta qualità può essere ottenuto in 40-50 minuti con elevata purezza ed è privo di contaminazione da proteine ​​e DNA genomico.

Gatto. No Dimensione dell'imballaggio
4992236  50 preparazioni

Dettagli del prodotto

Esempio sperimentale

FAQ

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Caratteristiche

■ I tamponi ottimizzati per i tessuti animali rendono il processo semplice e conveniente.
■ L'esclusiva DNasi I riduce al minimo la contaminazione del DNA genomico.
■ L'RNA di maggiore purezza e pronto all'uso è adatto per applicazioni a valle sensibili.
■ Nessuna estrazione con fenolo/cloroformio, nessuna precipitazione di LiCl ed etanolo e nessuna centrifugazione in gradienti di CsCl, il che rende il processo sicuro e affidabile.

Applicazioni

■ RT-PCR.
■ Macchia del nord, Macchia del punto.
■ PCR in tempo reale.
■ Analisi del chip.
■ Screening PolyA, traduzione in vitro, analisi della protezione RNasi e clonazione molecolare.

Tutti i prodotti possono essere personalizzati per ODM/OEM. Per dettagli,fare clic su Servizio personalizzato (ODM/OEM)


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    Experimental ExampleExperimental Example Materiale: 20 mg di embrione (13 giorni), 15 mg di rene, 10 mg di fegato, 15 mg di milza, 10 mg di timo, 20 mg di polmone
    Metodo: l'RNA totale da diversi campioni di tessuto di ratto è stato purificato utilizzando il kit RNAprep Pure Tissue.
    Risultati: L'immagine dell'elettroforesi su gel di agarosio è mostrata sopra. Sono stati caricati 2-4 µl di 100 µl di eluati per corsia.
    M: Marcatore DNA TIANGEN III;
    Corsia 1-2: Embrione (13 giorni); Corsia 3: Rene; Corsia 4-6: fegato; Corsia 7: Milza; Corsia 8: Timo; Corsia 9: Polmone.
    L'elettroforesi è stata condotta a 6 V/cm per 30 min su gel di agarosio all'1%.

     

     

     

    D: Blocco della colonna

    A-1 Lisi cellulare o omogeneizzazione non sufficiente

    ---- Ridurre l'utilizzo del campione, aumentare la quantità di tampone di lisi, aumentare l'omogeneizzazione e il tempo di lisi.

    A-2 La quantità di campione è troppo grande

    ---- Ridurre la quantità di campione utilizzato o aumentare la quantità di tampone di lisi.

    D: Bassa resa di RNA

    A-1 Lisi o omogeneizzazione cellulare insufficiente

    ---- Ridurre l'utilizzo del campione, aumentare la quantità di tampone di lisi, aumentare l'omogeneizzazione e il tempo di lisi.

    A-2 La quantità di campione è troppo grande

    ----Si prega di fare riferimento alla capacità di elaborazione massima.

    L'RNA A-3 non viene eluito completamente dalla colonna

    ---- Dopo aver aggiunto acqua RNasi-Free, lasciarla agire per alcuni minuti prima di centrifugare.

    A-4 Etanolo nell'eluente

    ---- Dopo il risciacquo, centrifugare nuovamente e rimuovere il più possibile il tampone di lavaggio.

    A-5 Il terreno di coltura cellulare non è stato completamente rimosso

    ---- Quando si raccolgono le cellule, assicurarsi di rimuovere il più possibile il terreno di coltura.

    A-6 Le cellule immagazzinate in RNAstore non sono efficacemente centrifugate

    ----La densità di RNAstore è maggiore del mezzo di coltura cellulare medio; quindi la forza centrifuga dovrebbe essere aumentata. Si consiglia di centrifugare a 3000x g.

    A-7 Basso contenuto di RNA e abbondanza nel campione

    ---- Utilizzare un campione positivo per determinare se la bassa resa è causata dal campione.

    D: degradazione dell'RNA

    A-1 Il materiale non è fresco

    ---- I tessuti freschi devono essere conservati immediatamente in azoto liquido o messi immediatamente nel reagente RNAstore per garantire l'effetto di estrazione.

    A-2 La quantità di campione è troppo grande

    ---- Ridurre la quantità di campione.

    Contaminazione da A-3 RNasin

    ----Sebbene il tampone fornito nel kit non contenga RNasi, è facile contaminare l'RNasi durante il processo di estrazione e deve essere maneggiato con cura.

    A-4 Inquinamento da elettroforesi

    ---- Sostituire il tampone per elettroforesi e assicurarsi che i materiali di consumo e il tampone di caricamento siano privi di contaminazione da RNasi.

    A-5 Troppo carico per l'elettroforesi

    ---- Ridurre la quantità di caricamento del campione, il caricamento di ciascun pozzetto non deve superare i 2 μg.

    D: Contaminazione del DNA

    A-1 La quantità di campione è troppo grande

    ---- Ridurre la quantità di campione.

    A-2 Alcuni campioni hanno un alto contenuto di DNA e possono essere trattati con DNasi.

    ----Eseguire un trattamento con DNasi privo di RNasi sulla soluzione di RNA ottenuta e l'RNA può essere utilizzato direttamente per esperimenti successivi dopo il trattamento o può essere ulteriormente purificato con kit di purificazione dell'RNA.

    D: Come rimuovere RNase dai materiali di consumo sperimentali e dalla vetreria?

    Per vetreria, cottura a 150°C per 4 h. Per i contenitori di plastica, immersi in 0,5 M NaOH per 10 min, quindi risciacquati accuratamente con acqua priva di RNasi e quindi sterilizzati per rimuovere completamente l'RNasi. I reagenti o le soluzioni utilizzati nell'esperimento, in particolare l'acqua, devono essere privi di RNasi. Utilizzare acqua priva di RNasi per tutte le preparazioni dei reagenti (aggiungere acqua a una bottiglia di vetro pulita, aggiungere DEPC a una concentrazione finale dello 0,1% (V/V), agitare durante la notte e autoclavare).

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