Nel dicembre 2019 è iniziata una serie di casi di polmonite di causa sconosciuta da Wuhan, provincia di Hubei, e presto diffuso nella maggior parte delle province e città della Cina e in molti altri paesi nel gennaio 2020. A partire dalle 22:00 il 27 gennaio in Cina sono stati segnalati 28 casi confermati e 5794 casi sospetti 2019-nCov. Illa fonte dell'infezione del virus è stata dedotta come Rhinolophus e l'attuale tasso di mortalità è del 2,9%.
Il 12 gennaio 2020, l'Organizzazione mondiale della sanità (OMS) ha annunciato che l'epidemia di polmonite è stata causata da un nuovo tipo di coronavirus (2019-nCov). Il coronavirus è un tipo di virus che si diffonde tra gli animali. Il tipo di acido nucleico del virus è RNA a singolo filamento. Allo stesso tempo, l'OMS ha anche rilasciato le informazioni sulla sequenza dell'acido nucleico di nCov condivise da studiosi cinesi, che hanno fornito la base di rilevamento molecolare per il rilevamento dei virus e ha reso possibile la rapida individuazione e identificazione dei patogeni.
L'OMS suggerisce che le persone che hanno malattie respiratorie acute come tosse, febbre, infezione del tratto respiratorio e sono state a Wuhan entro 14 giorni o sono state esposte al contatto con altri pazienti dovrebbero essere testate in modo completo. Il 17 gennaio 2020, l'OMS ha pubblicato il "Test di laboratorio per il nuovo coronavirus 2019 (2019-nCoV) in casi umani sospetti, guida provvisoria, 17 gennaio 2020". La guida sottolinea che i campioni da prelevare da pazienti sintomatici includono campioni respiratori (tamponi nasofaringei e orofaringei, espettorato, lavaggio broncoalveolare, ecc.) e campioni di siero, come segue:
*Per il trasporto di campioni per la rilevazione virale, utilizzare VTM (terreno di trasporto virale) contenente integratori antimicotici e antibiotici. Per la coltura batterica o fungina, trasportare a secco o in una quantità molto piccola di acqua sterile. Evitare il congelamento e lo scongelamento ripetuti dei campioni.
Oltre ai materiali di raccolta specifici indicati nella tabella, assicurano anche la disponibilità di altri materiali e attrezzature: ad es. contenitori di trasporto e sacche e imballaggi per la raccolta dei campioni, dispositivi di raffreddamento e impacchi freddi o ghiaccio secco, attrezzatura sterile per il prelievo di sangue (ad es. aghi, siringhe e tubi), etichette e pennarelli indelebili, DPI, materiali per la decontaminazione delle superfici.
Per il rilevamento del virus, è possibile utilizzare campioni di siero per rilevare il virus con metodo immunologico, mentre si consiglia la RTqPCR per rilevare l'acido nucleico nCov per un rilevamento più rapido e accurato. Come il virus
sequenza è nota, il contenuto di acido nucleico virale nel campione può essere rilevato rapidamente solo da
selezione di reagenti appropriati e primer corrispondenti
(Rilevamento diagnostico del coronavirus di Wuhan 2019 mediante RTPCR in tempo reale, protocollo e valutazione preliminare a partire dal 13 gennaio 2020) In qualità di leader nel campo dell'estrazione e del rilevamento di acidi nucleici in Cina, TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD. ha fornito reagenti per la rilevazione del virus mano-piede e dell'influenza A (H1N1) a più di 10 milioni di persone. Nel 2019, i reagenti per l'estrazione e il rilevamento dell'acido nucleico del virus di TIANGEN sono stati applicati a 30 milioni di campioni di peste suina classica africana, contribuendo in modo eccezionale alla diagnosi e alla prevenzione della peste suina classica africana in Cina. TIANGEN non solo fornisce reagenti per l'estrazione e il rilevamento di virus rapidi e precisi, ma fornisce anche strumenti di macinazione dei tessuti convenienti ed efficienti ed estrattori automatici di acido nucleico, che costituiscono un set completo di soluzioni per l'estrazione e il rilevamento dei virus.
Soluzione di estrazione di acidi nucleici automatizzata
Gli estrattori automatici di acidi nucleici TIANGEN sono piattaforme automatiche per l'estrazione di acidi nucleici utilizzando il metodo delle sfere magnetiche. L'applicazione di queste piattaforme non solo riduce notevolmente il carico di lavoro dei reparti di ispezione e quarantena, ma riduce anche gli errori operativi dell'estrazione manuale e garantisce la coerenza e la stabilità della qualità dell'acido nucleico estratto.
L'estrattore di acidi nucleici automatizzato TIANGEN ha vari flussi (inclusi 16, 24, 32, 48, 96 canali) e i reagenti corrispondenti possono essere utilizzati per l'estrazione dell'acido nucleico da una varietà di tipi di campioni. TIANGEN fornisce anche servizi di sviluppo di reagenti personalizzati e di integrazione di strumenti in base ai diversi requisiti sperimentali.
Omogeneizzatore di tessuti TGrinder H24
● Ampiamente usato per macinare e omogeneizzare vari tessuti e campioni di feci
● Con una forza di omogeneizzazione della molatura 2-5 volte quella degli strumenti tradizionali
● Macinazione e omogeneizzazione uniformi, evitando la contaminazione incrociata
● Dispositivo di protezione automatico per proteggere la sicurezza del personale di laboratorio
Estrattore di acidi nucleici automatizzato TGuide S32
● Velocità di campionamento: 1-32 campioni
● Volume di elaborazione: 20-1000 μl
● Tipo di campione: sangue, cellule, tessuti, feci, virus e altri campioni
● Tempo di elaborazione: fino a 8 min per ottenere l'acido nucleico virale
● Modalità di controllo: modalità di doppio controllo di Windows Pad e pulsante dello schermo
● Sviluppo della piattaforma: piattaforma aperta, reagenti abbinabili liberi
● Kit DNA/RNA virale magnetico TGuide S32 (DP604)
● Ampia applicazione: il DNA/RNA virale di alta qualità può essere purificato da siero, plasma, campione di tampone, soluzione per il trattamento dei tessuti e varie soluzioni di conservazione del virus.
● Semplice ed efficiente: questo prodotto è perfettamente abbinato all'estrattore di acidi nucleici automatizzato TGuide S32, in grado di estrarre il DNA/RNA del virus con alta resa, elevata purezza, qualità stabile e affidabile.
● Applicazioni a valle: l'acido nucleico purificato è adatto per esperimenti a valle di PCR virale e PCR in tempo reale.
Soluzione di estrazione manuale dell'acido nucleico
In qualità di leader nel campo dell'estrazione e del rilevamento degli acidi nucleici, TIANGEN possiede la serie più completa di prodotti per l'estrazione degli acidi nucleici in Cina, ideali per il rilevamento del coronavirus da tutti i tipi di campioni: sangue, siero/plasma, tessuto, tampone, virus , eccetera.
TIANamp Virus DNA/RNA Kit (DP315)
● Alta efficienza: è possibile ottenere DNA e RNA di virus di alta qualità mediante una rapida purificazione con un'elevata ripetibilità.
● Elevata purezza: rimozione completa di inquinanti e inibitori per l'applicazione a valle.
● Elevata sicurezza: non sono necessarie l'estrazione di reagenti organici o la precipitazione di etanolo.
Soluzione per il rilevamento di virus RNA
1. Sistema di pipettaggio automatizzato TEasy
●Alta precisione: il blocco di raffreddamento può mantenere la temperatura del campione di reagente al di sotto di 7 ℃ per più di 60 min. Ogni APM è calibrato secondo gli standard internazionali, che ha una precisione maggiore rispetto al pipettaggio manuale.
● Facilità d'uso: dimensioni ridotte. Peso leggero. Non è necessario alcuno strumento per sostituire i blocchi. Procedura di preparazione PCR/qPCR incorporata. Funzionamento manuale semplificato della preparazione della soluzione PCR.
● Ampia applicazione: può essere utilizzato per pipettaggio su piastre a 96/384 pozzetti, PCR, qPCR, rilevamento genico e altri esperimenti ad alto rendimento.
Kit One Step RT-qPCR FastKing (sonda) (FP314)
Il kit FastKing One Step RT-qPCR (Probe) (FP314) sviluppato da TIANGEN è un kit di rilevamento quantitativo a fluorescenza a trascrizione inversa onestep basato sul metodo della sonda, appositamente progettato per il rilevamento di geni in tracce in vari campioni. La KingRTase nel kit è una nuova trascrittasi inversa modificata molecolare, che ha una maggiore affinità per l'RNA e stabilità termica, con una migliore efficienza di trascrizione inversa e la capacità di estensione di modelli di RNA di struttura secondaria complessa. Viene inoltre applicata una nuova Taq DNA polimerasi hot start per conferire alla reazione PCR una maggiore efficienza e specificità di amplificazione. Inoltre, il kit semplifica al massimo i componenti miscelando Taq ed enzima MLV nella miscela enzimatica e premiscelando il tampone ionico, i dNTP, lo stabilizzatore PCR e l'enhancer in MasterMix, in modo che le fasi di miscelazione multicomponente possano essere
semplificato.
● Alta efficienza: l'eccellente trascrittasi inversa e DNA polimerasi garantiscono un'elevata efficienza di reazione
● Buona reversibilità: la polimerasi può leggere attraverso il modello di RNA con un alto contenuto di GC e una struttura secondaria complessa
● Ampie applicazioni: elevata applicabilità a modelli di RNA con impurità di specie diverse
● Alta sensibilità: i modelli a partire da 1 ng possono essere identificati con precisione, specialmente per i modelli a bassa abbondanza
Esempio per il rilevamento di virus a RNA
L'acido nucleico dell'influenza aviaria H5 è stato estratto dal kit TGuide S32 Magnetic Viral DNA/RNA (DP604). Il kit FastKing One Step RT-qPCR (Probe) (FP314) è stato utilizzato per il rilevamento di RT-qPCR utilizzando sonde e primer specifici per l'influenza aviaria H5.
ABi7500Fast è stato utilizzato per il rilevamento di RT-qPCR. I risultati dell'antigene del virus dell'influenza aviaria H5 (10-2, 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 e 10-7) da campioni da 200 μl mostrano un'elevata resa di estrazione dell'acido nucleico del virus, che può soddisfare la successiva esigenze di trascrizione inversa, PCR, RT-PCR, PCR in tempo reale, ecc. La PCR in tempo reale fornisce risultati con elevata sensibilità, buona ripetibilità e buona linearità della diluizione del gradiente. È possibile rilevare con precisione diverse concentrazioni di campioni di acido nucleico virale.
Tempo di pubblicazione: 11 aprile-2021
